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上海遠慕生物科技有限公司

ECC選擇性顯色培養基實驗原理
點擊次數:914 更新時間:2020-09-21

原理

HiCrome ECC顯色培養基使用了HiVeg特別蛋白胨替代動物源特別蛋白胨,使得培養基無BSE/TSE風險。該培養基為鑒別培養基,用于初步鑒定來自食品和環境樣品的大腸桿菌和其他大腸菌群(3)。

培養基含兩種顯色原。一種被大腸埃希菌的葡萄糖醛酸酶裂解,產生藍色至紫色菌落,另一種被大腸菌群的半乳糖苷酶裂解,產生玫瑰紅-粉色菌落(1,2)。HiVeg特別蛋白胨和酵母粉提供氮源物質、維生素B和其他必要生長營養素。乳糖提供可發酵的碳水化合物,中性紅為pH指示劑。磷酸氫二鈉和磷酸/二氫鉀為培養基的緩沖液。氯化鈉有助于維持滲透壓平衡。

使用前使培養基表面干燥。用0.1%的HiVeg蛋白胨水(貨號MV028)進行1:5或1:10稀釋食品樣品并進行樣品勻漿。將勻漿液0.5ml或1ml用無菌玻璃涂布棒涂布在瓊脂表面并在35-37°C孵育18-24小時。孵育結束后對藍/紫菌落進行計數,并乘以稀釋因子。大腸埃希菌的數目以每g食品為單位報告。

培養基組成

成分

克/升

HiVeg特殊蛋白胨

5.00

酵母粉

3.30

乳糖

2.50

磷酸氫二鈉

3.50

磷酸/二氫鉀

1.50

氯化鈉

5.00

顯色混合劑

20.30

中性紅

0.03

瓊脂

15.00

終 pH (25°C) 6.8±0.2

配制

55.83克溶于1000 ml蒸餾水。輕輕加熱使培養基*溶解。15磅(121℃)高壓滅菌15分鐘。冷卻至50℃。混勻并傾注無菌平皿。培養基可能不透明,不過不影響其性能。

質量控制

粉末外觀:淡粉色均一自由流動粉末。

成膠性:結實,相當于1.5%瓊脂糖凝膠。

制備好的培養基的顏色和透明度:平皿內為粉紅色不透明凝膠。

配比后的pH值:5.58%水溶液(5.58g干粉/100ml水溶液)配好后,pH值自動為6.8 ± 0.2(25°C)。

培養反應

35-37°C培養18-24小時后,觀察培養反應

有機體

生長

菌落顏色

大腸桿菌(ATCC 25922)

旺盛

藍/紫

肺炎克雷伯菌(ATCC 13883)

旺盛

玫瑰紅/粉紅

銅綠假單胞菌(ATCC 27853)

好-旺盛

稻草色

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