動物細胞培養(animal cell culture)就是從動物機體中取出相關的組織,將它分散成單個細胞(使用胰蛋/白酶或膠原蛋白酶)然后,放在適宜的培養基中,讓這些細胞生長和增殖。
細胞培養基的種類有哪些?
按照細胞培養基的發展歷史,細胞培養基大致可分為平衡/鹽溶液、天然細胞培養基、合成細胞培養基、無血清細胞培養基、限定化學成分細胞培養基等幾大種類。
1.DMEM細胞培養基
DMEM(Dulbecco’s modified Minimal Essential Medium)是由Dulbecco在MEM培養基的基礎上改良獲得的,各成分份量加倍,分低糖(1000mg/L)、高糖(4500mg/L)兩種類型。細胞生長快。附著稍差的腫瘤細胞、克隆培養用高糖效果較好,常用于雜交瘤的骨髓瘤細胞和DNA轉染的轉化細胞培養。
2.神經元基礎培養基
可為神經元生長提供基礎營養物質。
3.IPL-41 遠慕生物昆蟲培養基
IPL-41昆蟲培養基(IPL-41 Insect Medium)旨在用于大規模擴增草地貪夜蛾(Spodoptera frugiperda)細胞系,也常用于通過桿狀病毒表達系統(BEVS)進行蛋白表達。 IPL-41培養基是對原始IPL配方的改良,由美國農業部昆蟲病理實驗室Weiss等人開發,用于大規模擴增草地貪夜蛾衍生細胞系。Weiss向基礎培養基中加入了胎牛血清和TPB培養基(Tryptose Phosphate Broth),成功地實現了IPL-21 AE (III)細胞系的大規模連續培養。
該培養基主要用于培養和維護鱗翅類衍生細胞系和擴增這些細胞系的病毒。IPL-41培養基基礎也以用于無血清夜蛾細胞的桿狀病毒重組蛋白表達。
1.1 平衡/鹽溶液(balanced salt solution,BSS)
BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細胞滲透壓平衡,保持pH穩定及提供簡單的營養。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等。
目前用于細胞培養的血清主要是牛血清,培養某些特殊細胞也用人血清、馬血清等。牛血清對絕大多數哺乳動物細胞都是適合的,但并不排除在培養某種細胞時使用其他動物血清更合適。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。
1.2 合成細胞培養基
合成培養基是根據天然培養基的成分,用化學物質模擬合成、人工設計、配制的培養基。最早開發的基礎培養基(minimal essential medium, MEM),其本質為含有鹽、氨基酸、維生素和其他必需營養物的pH緩沖的等滲混合物。在此基礎上,DMEM、IMDM、HAM F12、PRMI1640等各種合成細胞培養基被不斷開發出來。